聚丙烯酰胺凝胶的制备方法如下：

准备材料

丙烯酰胺（30%浓度，配制量根据所需凝胶体积和浓度确定）

N,N'-亚甲基双丙烯酰胺（Bis，作为交联剂）

过硫酸铵（AP，催化剂）

四甲基乙二胺（TEMED，加速剂）

三羟甲基氨基甲烷（Tris，用于调节pH值）

硼酸（用于调节pH值）

甘油（用于调节pH值）

十二烷基硫酸钠（SDS，用于电泳缓冲液）

AgNO3（用于制备显色液）

NaOH、Na2CO3、37%甲醛（用于显色液）

冰乙酸（用于电泳缓冲液）

配制溶液

将丙烯酰胺、Bis、AP、TEMED按照比例称量，加入适量的超纯水，充分搅拌溶解。调整pH值至所需范围（通常为7-8）。

分别配制分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液，使用Tris和硼酸或甘油调节pH值。

制备电泳缓冲液，通常包括Tris、甘氨酸和SDS。

制胶

在模具中灌入分离胶液，至一定高度后用水封顶，聚合完毕倾去水层。

在分离胶上灌入浓缩胶液，插入样品梳，待浓缩胶液聚合后除去样品梳或水。

保存

配制好的凝胶溶液应保存在4℃的冰箱中，避免过硫酸铵失去催化作用。

使用

将制备好的聚丙烯酰胺凝胶用于电泳或其他生物学实验。

请注意，在制备过程中要确保所有材料和仪器的清洁，避免污染。此外，制备好的凝胶应尽快使用，避免长时间保存，以免影响实验结果。