聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是一种常用的蛋白质分离和纯化技术,具有以下优点:
高分辨率:
通过使用不同浓度的凝胶系统和不连续的缓冲液系统,可以显著提高样品分离的分辨率。
分子量测定:
在电泳过程中,蛋白质的迁移率主要取决于其分子量大小,而受其原始电荷和形状的影响较小,因此可以准确测定蛋白质的分子量。
可调节的孔径:
通过调整丙烯酰胺单体和交联剂的浓度,可以控制凝胶的孔径大小,从而分离不同分子量的生物大分子。
化学惰性好:
聚丙烯酰胺凝胶的侧链是不活泼的酰胺基团,没有带电的其他离子基团,因此在电泳过程中不会产生电渗现象。
重复性好:
由于可以制得高纯度的单体原料,电泳分离的重复性较好。
透明度和机械强度:
聚丙烯酰胺凝胶透明度高,便于照相和复印;同时具有良好的机械强度和弹性,不易碎,便于操作和保存。
无紫外吸收:
聚丙烯酰胺凝胶没有紫外吸收,因此可以在不染色的情况下进行紫外波长的凝胶扫描定量分析。
多功能性:
除了用于蛋白质分离外,聚丙烯酰胺凝胶还可以用作固定化酶的惰性载体。
操作简便:
与其他电泳方法相比,聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作相对简单,时间短。
适用性广:
电泳可以在酸性或碱性缓冲液中进行,适用于多种生物分子的分离。
综上所述,聚丙烯酰胺凝胶电泳在蛋白质分离和纯化方面具有显著的优势,是实验室中常用的技术之一。
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